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抗體粗純化試劑盒

簡要描述:一、原理
本試劑盒采用鹽析法,該純化方法是基于在待純化血清中加入鹽溶液,由于抗體也是一種蛋白質(zhì),其在水溶液中的溶解度是由其本身攜帶的親水基團(tuán)數(shù)和電荷數(shù)決定的,當(dāng)向抗血清中加入飽和鹽溶液后,鹽離子與抗體競爭溶液中的水分子,因?yàn)辂}離子與抗體分子相比,具有更強(qiáng)的親水性,因此抗體分子表面的水化膜被破壞,同時(shí)其暴露出來的帶電基團(tuán)被溶液中的鹽離子所中和進(jìn)而導(dǎo)致其溶解度大大降低,依據(jù)此原理從而將其從抗血清中分離

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2019-04-28
  • 訪  問  量:1525
詳情介紹
  • 原理

本試劑盒采用鹽析法,該純化方法是基于在待純化血清中加入鹽溶液,由于抗體也是一種蛋白質(zhì),其在水溶液中的溶解度是由其本身攜帶的親水基團(tuán)數(shù)和電荷數(shù)決定的,當(dāng)向抗血清中加入飽和鹽溶液后,鹽離子與抗體競爭溶液中的水分子,因?yàn)辂}離子與抗體分子相比,具有更強(qiáng)的親水性,因此抗體分子表面的水化膜被破壞,同時(shí)其暴露出來的帶電基團(tuán)被溶液中的鹽離子所中和進(jìn)而導(dǎo)致其溶解度大大降低,依據(jù)此原理從而將其從抗血清中分離。

  • 產(chǎn)品特點(diǎn)
  1. 試劑盒內(nèi)含有分析所需的所有必需試劑,操作簡單便捷;
  2. 試劑盒內(nèi)組分經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,確保更高的檢測靈敏度;
  3. 保存條件:2-8。
  4. 規(guī)格:待純化抗體1-5ml

三、所需材料

儀器:離心機(jī)、離心管(5mL、15 mL、50mL)

試劑:去離子水

四、 試劑盒組成

組成部分

裝量

A液

10ml

B液

15ml

C液

5 mL

 

  • 純化步驟
  1. 樣品準(zhǔn)備:將抗血清與A液預(yù)冷后按體積比1:2混合。
  2. 鹽析:將B液預(yù)冷,向上述混合溶液中加入等體積B液,邊滴加邊搖勻(在冰浴上進(jìn)行),然后迅速轉(zhuǎn)入離心機(jī)內(nèi)離心,8000r/min離心5min。
  3. 洗滌:去上清,將沉淀用去離子水清洗1遍(注意:切勿用水流沖洗沉淀)。
  4. 復(fù)溶:迅速將洗滌后的沉淀用等體積C液溶解,得粗純抗體。
  • 注意事項(xiàng)
  1. B液在冷藏條件下有晶體析出屬正常現(xiàn)象。
  2. A液和B液需要提前預(yù)冷,且粗純過程在冰浴上進(jìn)行。
  3. 洗滌沉淀時(shí)水流沿沉淀反方向進(jìn)入,沿沉淀方向流出。
  4. 沉淀應(yīng)及時(shí)復(fù)溶。
  5. 將所純化的抗體加入10%-20%的甘油置于-20攝氏度或者-80攝氏度即可長期保存。

 

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